养细胞的小伙伴们都知道，细胞一定要传代，因为细胞在培养过程中不断的繁殖，数量也随之增加，然而培养皿/培养瓶的空间有限，增殖受到抑制，所以必须将一部分细胞移至别的培养皿/培养瓶，让细胞有足够生长空间。  
细胞传代也不仅仅是为细胞安一个更大的“家"，更重要的，是使细胞系或细胞株进一步增殖，这样，我们才能有足够的细胞做各种各样的实验。  
但是，对于传代的时间，很多小伙伴都掌握不好，因为对于不同的细胞来说，判断能否开始传代的标准略有不同，今天，我们就主要来聊一下，细胞传代的时间问题。  
什么时候进行细胞传代?  
对于贴壁培养和悬浮培养而言，判断是否需要传代主要看以下2个方面：  
•细胞密度：  
贴壁培养细胞进入对数生长期、未达到汇合状态时即应进行传代，正常细胞达到汇合状态时会停止生长(接触抑制)，重新接种后需要较长时间才能恢复，转化细胞即使达到汇合状态也能继续增殖，但是在经过大约两个倍增时间后通常会变质。类似地，  
悬浮培养的细胞进入对数生长期、未达到汇合状态时也应进行传代。达到汇合状态时，悬浮培养的细胞会聚集成团块，转动培养瓶时培养基会变得浑浊。  
•培养基耗竭：  
生长培养基pH值降低通常表示乳酸蓄积，乳酸是细胞代谢的副产物。乳酸有细胞毒性，而且pH值降低也是细胞生长的不利因素。pH值改变的速度通常取决于培养体系中的细胞浓度，细胞浓度越高，培养基耗竭的速度越快。  
如果发现pH值迅速降低(>0.1–0.2pH单位)，同时细胞浓度增大，则应对细胞进行传代。

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